零根底上手！单细胞测序样本制备、试验流程、文库构建一次说清

  单细胞测序技能是当下研讨的一个大抢手，不仅在顶尖试验室被大范围的运用，就连在我们周围的试验室里，也有不少的研讨者开端从单细胞下手，取得研讨的进一步打破。眼瞅着他人重量级的效果一个接一个，论文一篇接一篇，自己却还在单细胞研讨的门口打转：

  针对以上问题，丁香园联合瑞沃德展开「单细胞测序全解析：从样本制备、单细胞捕获到文库构建」专题直播，将从单细胞测序技能的根底实操讲起，带我们快速入门上手！报名直播还可请求纳米磁珠细胞分选产品、单细胞悬液制备仪试用，还有蓝牙音响、精巧帆布包、钥匙扣等礼品等你来拿～

  一起，课程实时答疑，现场为我们解惑。文内为我们理了一些遍及的问题的 Q&A，期望能够处理我们的问题。

  单细胞测序的流程包含：单细胞捕获——单细胞裂解——遗传物质的提取扩增——文库构建、测序与数据处理。相对于传统测序尽管更为杂乱一点，可是单细胞测序也已经是一项很老练的技能了。本次课程会为我们做一个单细胞测序的技能详解，在详细为我们拆解了各过程的原理后，信任单细胞测序技能也不难上手。

   新鲜安排样本主张当即处理，否则需置安排于保存液中，4 ℃ 保存，一般能保持 72 h。

  两者运用的场景不同，一般优先引荐单细胞转录组，假如样本是冷冻或许大粒径细胞 (直径 60 um) ，那就主张提取细胞核。与单细胞转录组比较，单细胞核转录组捕获到的基因总数比削减了约20%~40%。但在细胞分群上两者数据具有可比性，单细胞核转录组测序具有保持细胞标志物的表达，更简单判定稀有细胞群，没太多应激基因表达等优势，可是免疫细胞捕获灵敏度较低，不太合适进行免疫组库或许针对免疫细胞检测。

  ● 核酸外溢：很多细胞被裂解后开释很多 DNA，使得细胞集合粘稠。处理方案：添加酶混合液中 Dnase 酶的浓度。

  ● 安排样本问题：较大的软质地肿瘤安排血管环绕多。处理方案：下降裂红溶液浓度或许削减裂红时刻；选材过程中，细心除掉血管和残留的血块等杂质，重复漂洗洁净肿瘤安排，处理洁净非实质的粘膜等。

  ● 消化过度：消化时刻过久/酶解试剂挑选有误。处理方案：调整酶混合液浓度和酶解时刻进行改进，恰当考虑参加纯度更高杂质更少的酶

  更多内容报名直播观看，将为我们详细的介绍技能的开展，并且会以详细的样本为例，把样本前处理、细胞捕获以及文库构建的内容逐个详解，一起，课程实时答疑，现场为我们答疑解惑。单细胞，这次一定为你讲透！